蛇莓的组培技术研究附详细培养基配方！

蛇莓[Duchesnea indica (Andr.) Focke]又名蛇泡草、蚕莓等，是蔷薇科的一种多年生草本植物，全株有柔毛，匍匐茎长。多野生于山坡、草地上、路旁。全草可供药用，有清热解毒、活血化瘀、收敛止血的作用。

2外植体材料

茎尖、叶片。

3培养基

（1）茎尖诱导和芽分化培养基为：MS+ NAA 0.1-0.3mg/L+ BA 1.0mg/L；

（2）叶片愈伤组织诱导培养基为：MS+ 2,4-D 0.5mg/L+ BA 0.25mg/L+ KT 0.25mg/L+ NAA 0.025mg/L；

（3）丛生芽分化培养基为：MS+ NAA 0.05mg/L+ BA 0.5mg/L；

（4）生根培养基为：MS+ IBA 0.05- 0.1mg/L。

以上培养基中均加入3%蔗糖、6.5%琼脂，pH5.8，培养温度 25℃，每天光照12小时，光照强度为1000lx。

4外植体消毒

采取健壮的匍匐茎，用清水洗干净，在流水下冲洗1h，然后在超净工作台上用75%酒精消毒30s，再用0.1%升汞消毒7min，无菌水冲洗5-6次。用无菌滤纸吸干茎段表面的水分，挑取茎尖接种到茎尖诱导培养基上。

5分化及生长

茎尖在诱导培养基（1）上，约12天后开始膨大，20天后愈伤长大，开始形成芽点，约40天后将长大的芽状物剪切放入培养基（3）上。等芽长大后将试管苗的叶片剪成小块接种于培养基（2）上，约8天后叶片叶片边缘开始形成愈伤，经过13天培养后，开始变绿形成芽点，继而分化形成芽。待小苗长高约2-3cm时，并且每株有2-3个叶片时即可转入生根培养基（4）进行生根。

6移栽炼苗

待小苗在生根培养基中长出4-5个根时，即可出瓶炼苗。将小苗移栽于处理过的蛭石中，浇透水，上盖塑料薄膜保湿4-5天，温度控制在20-30℃，约两周后待小苗长出新根、新叶时即可进行常规管理。

7意义

蛇莓在试管中容易发生匍匐茎。一般形成两级匍匐茎，较少发生三级匍匐茎，匍匐茎上的茎芽可以在试管中生根形成完整植株，也可以利用这个特点来繁殖及研究匍匐茎的发生规律。本文介绍的组织培养方法可为蛇莓进行种质资源的试管保存、苗林繁殖和合理开发利用及其今后的遗传转化奠定基础。